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动物细胞培养条件二氧化碳的作用(动物细胞培养条件温度和ph)

动物细胞培养条件?

细胞培养的条件

1.所有与细胞接触的设备、器材和溶液等,都必须保持绝对无菌,避免细胞外微生物的污染。

目前最可靠和最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。

如:玻璃制品、布类、金属制品:6.8kg20min。

橡胶制品:3.6~4.5kg10min。

培养用液,如Hanks液,水解乳蛋白:3.6~ 4.5kg10min。

实验中染菌物品和动物尸体等:6.8 kg20min。

试管、吸管等,则可采用干热灭菌;

一切不适于加热灭菌的液体,如人工合成培养液、小牛血清、胰蛋白酶等溶液,可采用过滤法除菌。

细胞培养中常用的消毒剂浓度及其使用场合

2.必须有足够的营养供应,而绝对不可有有害的物质,包括极微量的有害离子的掺入,为此必须注意器材的清洗和配液用水的质量。

细胞培养中对水的质量要求很高(见水处理)。

3.保证有适量的氧气供应。

细胞代谢需要有空气,否则细胞死亡。在用培养瓶进行静止培养,或用转瓶进行旋转培养时,只要培养的液体量不超过总容量的30%,通过与液面的空气交换,可以保证细胞有足够的氧气。当用罐子深层培养时,则必须通气,一般采用含5%CO2的空气,或根据需要将CO2、N2、O2和空气以不同比例混合,过量氧对细胞的生长也不利。

4.需随时清除细胞代谢中产生的有害产物。

细胞在代谢过程中会产生大量代谢废物,如CO2、乳酸、氨、尿素、吲哚等,这些产物对细胞的生存有害,必须及时清除。在小量培养时,当培养基中酚红指示剂显示黄色,表示已有相当量乳酸产生,要及时更换新鲜的培养基。在大量培养时,则需随时测定葡萄糖和乳酸等含量,并调节灌流速度,使代谢产物保持在无害水平下。

5.有良好的适于其生存的外界环境,包括温度、pH、渗透压和离子浓度等。

不同的细胞对pH的要求不同,一般来说适于细胞生长的pH在6.8~7.4,过高或过低均不利于细胞生长。如上所述,细胞在代谢过程中会产生大量乳酸,使培养的pH下降。为了保持培养液的pH,常在培养液内加入各种缓冲系统,如Na2HPO4/Na2HPO4、NaHCO3/H2CO3(CO2)、Tricineglycine,以及加缓冲剂Hepes液(常用浓度为10~50mol/L).

6.及时分种,保持合适的细胞密度(见细胞传代)

动物细胞培养意义?

1、动物细胞培养的目的是为了获得细胞产物或细胞群。

2、动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散开。

3、动物细胞培养和动物组织培养方法不完全相同,前者需要用胰蛋白酶出来,而后者不需要用胰蛋白酶处理。

4、不能通过细胞培养技术获得完整的动物个体,目前只能通过核移植技术获得完整的动物个体

动物细胞培养知识点?

动物细胞的培养:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。

动物细胞培养方法?

动物细胞培养法

在所有的细胞离体培养中,最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。

⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。

⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃,塑料等作为支持物。

⑶气体交换:二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节,不断维持所需要的气体条件。

关于动物细胞组织培养?

动物细胞培养是动物组织培养的一种,但是现在常常将动物细胞培养看做动物组织培养,其实深究下,还是有所差异:动物组织培养,原来是指小块动物组织的体外培养,现在用以泛指组织、器官和细胞的体外培养.组织和器官培养,是指将组织、整个的或部分的器官在体外培养或生长,并保持组织或器官的分化、结构和(或)功能.由于操作和应用上的限制,组织和器官培养应用很少,而广泛应用的是细胞培养技术.细胞培养分为单层细胞培养和悬浮细胞培养.单层细胞培养包括静止培养和使用转瓶旋转培养,使细胞在器皿的表面生长出单层或数层细胞.悬浮细胞培养,是指细胞悬浮于营养液中繁殖的一种培养方法,它可进行连续培养,便于工业生产,常用来繁殖病毒生产疫苗.

动物细胞培养的条件?

动物细胞培养需要满足以下条件:

①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理.通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染.此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害.

②营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等.通常需加入血清、血浆等天然成分.

③温度:适宜温度:哺乳动物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4.

④气体环境:95%空气+5%CO2.O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH.

解答: 解:动物细胞培养必需条件的是:无菌、无毒的环境;营养;适宜的温度和pH;气体环境.动物细胞培养不需要光照条件.

动物细胞应该如何培养呢?

取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用胶原蛋白酶)处理(消化),形成分散的单个细胞,将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外,原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。当细胞从动植物中生长迁移出来,形成生长晕并增大以后,科学家接着进行传代培养,即将原代培养细胞分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖。通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质。培养条件:

1、无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。

2、营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等)。

3、血清和血浆 。(提供细胞生长必须的营养成份)4、温度和pH。(36.5±0.5℃,7.2~7.4)5、气体环境。(95%的空气+5%CO?的混合气体)扩展资料:动物细胞有细胞核、细胞质和细胞膜,没有细胞壁,液泡不明显,含有溶酶体,动物细胞的结构有细胞膜、细胞质、细胞器、细胞核;它们的主要作用是控制细胞的进出、进行物质转换、生命活动的主要场所、控制细胞的生命活动。细胞内部有细胞器:细胞核,双层膜,包含有由DNA和蛋白质构成的染色体。内质网分为粗面的与滑面的,粗面内质网表面附有核糖体,参与蛋白质的合成和加工;光面内质网,表面没有核糖体,参与脂类合成。植物细胞与动物细胞区别:1、培养基不同:植物细胞(固体培养基),动物细胞(液体培养基)。2、培养基的成分不同:动物细胞培养必须利用动物血清,植物组织培养则不需要,而需要加入植物生长素。3、产物不同:植物组织培养最后一般得到新的植物个体,而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性,因此得到的是只含同一种的细胞的一个细胞系(或者叫细胞群)。

4、原理不同:植物组织培养的原理为植物细胞的全能性,动物细胞培养的原理为细胞的增殖分化。

5、过程不同:植物组织培养的过程为脱分化和再分化,动物细胞培养的过程为原代培养和传代培养。